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細胞劃痕實驗不再難，明美活細胞掃描分析儀動態追蹤細胞遷移

發布時間：2026-04-09

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細胞劃痕實驗是解析細胞遷移的常規實驗，常見于腫瘤學、發育生物學、再生醫學等領域。其核心實驗邏輯為：在融合生長的細胞單層上用移液槍頭劃一道均勻的“劃痕”（模擬體內組織損傷的“傷口”），洗去劃落的細胞后繼續培養，通過不同時間點觀察劃痕區域的細胞遷移、填充情況，量化細胞的運動能力。

細胞劃痕實驗的工作流程：

01 實驗準備

（溫馨提醒：提前1-2天完成，避免操作倉促）
1. 細胞準備：復蘇目標貼壁細胞，傳代培養至對數生長期（細胞活性 80%-90%，遷移能力最強，避免老化細胞）；
2. 耗材試劑：6 孔板 / 12 孔板（最常用，劃痕視野適中）、無菌 10μL/200μL 移液槍頭（統一規格，保證劃痕寬度一致）、無血清培養基 / 低血清培養基（抑制細胞增殖，聚焦純遷移；若需研究 “增殖 + 遷移”，用常規完全培養基）、PBS 緩沖液、明美活細胞掃描分析儀MCS31
3. 耗材預處理：孔板可提前做標記（在板底背面劃橫線，等距分布，方便后續定位同一劃痕區域拍照）。


02鋪板培養
（核心前提：形成致密細胞單層，單層無間隙）
1. 取對數生長期細胞，胰酶消化后用完全培養基重懸，計數并調整細胞濃度（如 6 孔板約 5×10?個 / 孔，12 孔板約 2×10?個 / 孔，根據細胞大小微調）；
2. 按定濃度將細胞懸液加入標記好的孔板，輕輕晃動使細胞均勻分布，避免局部堆積；
3. 置于 37℃、5% CO?培養箱中培養24-48h，直至細胞形成100% 融合的致密單層（單層無空隙，否則會干擾劃痕愈合結果判斷）。

03畫制劃痕
（核心關鍵：劃痕均勻，無偏移、細胞殘留）
1. 取出培養板，超凈臺內操作，用無菌移液槍頭（同一規格），沿板底提前劃好的橫線垂直勻速劃過細胞單層（可用孔板蓋子作為劃線工具，避免斜劃）；
2. 劃完后輕提槍頭，避免刮擦孔底導致細胞層脫落，肉眼觀察劃痕為清晰、連續的空白線條即可。

04清洗細胞

（去除劃落的細胞碎片，避免碎片干擾愈合）
1. 劃痕后，孔內會有大量劃落的細胞和碎片，用無菌 PBS 緩沖液輕輕潤洗細胞層2-3 次；
2. 潤洗時緩慢滴加 PBS，沿孔壁流下，避免直沖劃痕區域導致細胞脫落，最終洗去所有懸浮的細胞和碎片，使劃痕區域無殘留。

05加液培養
（定時放置培養，根據實驗目的選培養基）
1. 按實驗目的加入對應培養基：研究純細胞遷移：加入無血清 / 低血清培養基（血清含生長因子，會促進細胞增殖，低血清可最大程度抑制增殖）；研究增殖 + 遷移共同作用：加入常規完全培養基；
2. 將培養板放回 37℃、5% CO?培養箱中繼續培養，做好實驗計時（從加液完成開始）。

06記錄劃痕愈合過程
（定位拍照，保證視野一致）
使用明美活細胞掃描分析儀MCS31的細胞劃痕模塊，應用劃痕分析。



圖1 MCS31及其細胞劃痕檢測界面
MCS31能夠輕松完成細胞劃痕的監測與分析：
可以自動識別劃痕區域
準確定位同一視野下的細胞劃痕，使測量保持一致
自動分析劃痕面積變化，最大限度提高實驗效率，減少人為誤差
生成延時視頻，突破傳統的終點法測量，實現細胞劃痕的動態觀察。

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